Органическая химия

Взгляд из лаборатории

FONT_SIZE

SCREEN

Cpanel

Статьи

Абсолютизирование – это процесс подготовки безводного растворителя... Читать далее...

Видеоуроки

Видеоурок, посвященный основам Интерпретации ИК и масс-спектров. Смотреть...

Реактивы для обнаружения веществ на ТСХ.
Органические соединения.

Источник: Э. Шталь "Хроматография в тонких слоях". М., 1965

Универсальные

Обнаруживаемая группа

Реактив

Состав реактива и проведение обработки

Ненасыщенные соединения Флуоресцеин - бромная проба
Посмотреть
Массу для нанесения готовят с 0,04% водным раствором флуоресцеина натрия вместо воды. После разделения продувают над высушенной пластинкой пары брома. В результате образования эодина флуоресценция гасится всюду, за исключением пятен веществ, которые присоединяют бром за счет ненасыщенных связей.
Универсальный реактив Перманганат калия - уксусная кислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: смесь равных объемов 0,1 н. Раствора перманганата калия и 2 н. уксусной кислоты.
Универсальный реактив Перманганат калия - серная кислота (универсальный реактив)
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 0,5 г перманганата калия в 15 мл концентрированной серной кислоты. (Осторожно! Опасность взрыва).Проведение реакции: хроматограмму высушивают от растворителя и опрыскивают реактивом; вещества появляются в виде белых пятен на розовом фоне.

Азотсодержащие гетероциклы и амины

Обнаруживаемая группа

Реактив

Состав реактива и проведение обработки

Азотсодержащие гетероциклы и амины Малоновая кислота - салициловый альдегид
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 0,2 г малоновой кислоты и 0,1 г салицилового альдегида растворяют в 100 мл абсолютного этанола.
Последующая обработка: пластинки нагревают в течение 15 мин до 120 0C., а затем рассматривают в фильтрованном ультрафиолетовой свете (желтое флуоресцирующее пятно).
Азотсодержащие гетероциклы 4-Метилумбеллиферон
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 20 мг 4-метилумбеллиферона растворяют в 35 мл этанола. Раствор в мерной колбе на 100 мл доводят до метки водой.Последующая обработка: хроматограмму помещают в сосуд с парами аммиака, а затем рассматривают под аналитической кварцевой лампой.
Ароматические и гетероциклические соединения Флуоресцеин натрия
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 50 мг флуоресцеина натрия растворяют в 100 мл борного метанола.Примечание. При равномерном опрыскивании можно обнаружить на хроматограмме различные соединения с помощью кварцевой лампы.
Имидазолы (N-замещенные) Раствор йода
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 1 г йода растворяют в 100 мл 96% этанола.Последующая обработка: нагревают 30 мин при 100 0C.
Индолы 4-Диметиламинобензальдегид-соляная кислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 1 г 4-диметиламинобензальдегида растворяют в 50 мл соляной кислоты (I,19) и смешивают с 50 мл этанола.
Последующая обработка: сразу после разделения пластики интенсивно опрыскивают, пока они не станут прозрачными (около 10 мл на каждую пластинку 20Х20 см). Пластинки, обработанные щелочным летучим растворителем, перед опрыскиванием нагревают 5 мин при 500. В заключение над слоем продувают пары "царской водки". "Царская водка: 3 объема соляной кислоты (1,19) +1 объем азотной кислоты 1,40).
Индолы Коричный альдегид - соляная кислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 5 мл коричного альдегида растворяют в 96%-ном этаноле и добавляют 5 мл соляной кислоты (1.19) (готовят свежий).
Индолы Надхлорная кислота (перхлорная кислота) - хлорид железа (III)
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 100 мл 5%-ной перхлорной кислоты смешивают с 2 мл 0,05 М раствора хлорида железа (III).
Примечание. Не реагирует с изатином и другими производными оксиндола.
Индолы Формальдегид - соляная кислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: готовят свежую смесь из 10 мл раствора формальдегида (36%), 10 мл чистой 25% соляной кислоты и 20 мл этанола.Последующая обработка: нагревают 5 мин при 100 0C. Флуоресценцию в УФ-свете (365 нм желто-оранжево-зеленоватая) можно усилить действием паров царской водки.
Пурины Нитрат серебра - бромфеноловый синий
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 0,2 г бромфенолового синего растворяют в 50 мл ацетона. Раствор смешивают с 50 мл 2% водного раствора нитрата серебра (устойчив около недели).Проведение реакции: после обработки восходящим кислым раствором хроматограмму следует высушить и поместить в пары аммиака. Затем пары аммиака удаляют теплым воздухом и опрыскивают.
Хинолины Борная кислота - лимонная кислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 0,5 г борной кислоты и 0,5 г лимонной кислоты растворяют в 20 мл метанола.
Последующая обработка: l0 мин нагревают при 1000. (Наблюдение в монохроматическом ультрафиолетовом свете; 8-оксихинолин желтовато-зеленый).

Алкалоиды

Обнаруживаемая группа

Реактив

Состав реактива и проведение обработки

Алкалоиды Реактив Несслера
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: реактив Несслера. Примечание. По данным Шульца п Штрауса, с реактивом Неслера реагируют апоморфин, гидрастиинн и физостигмин.
Алкалоиды и N-содержащие гетероциклы Йодоплатинат
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 3 мл 10%-наго раствора платино(IV)хлористоводородной кислоты смешивают с 97 мл воды и прибавляют 100 мл 6% водного раствора йодида калия. В темной склянке сохраняется длительное время.
Алкалоиды и амины Серная кислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: к 100 мл абсолютного этанола добавляют 50 капель серной кислоты (1,84).Примечание: Благодаря отщеплению воды от таких соединений как глюкозиды, алкалоиды и амины, образуются продукты разложения, которые флуоресцируют в монохроматическом УФ-свете.
Алкалоиды с пиридиновым кольцом Реактив Кенига
Посмотреть
Предварительная обработка. Перед опрыскиванием хроматограмму выдерживают в течение часа в камере, в которой находится стакан с раствором бромциана (яд!). Раствор бромциана готовят из охлажденной насыщенной бромом воды, в которую добавляют 10% раствор цианида натрия до исчезновения окраски брома.
Раствор для опрыскивания: 2 г. п-аминобензойной кислоты растворяют в 75 мл 0.75 н. соляной кислоты. Раствор 96% этанолом доводят до 100 мл.
Алкалоиды, органические соединения, содержащие йод и токоферолацетаты Сульфат церия (IV) - серная кислота (на солнечном свету реактив изменяется)
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 0.1 г сульфата церия (IV) растворяют в 4 мл воды. После добавления 1 г трихлоруксусной кислоты нагревают до кипения и медленно по каплям добавляют серную кислоту (1,84) до полного растворения.Последующая обработка: несколько минут нагревают при 110 0C до появления пятен. Реактив окрашивает алкалоиды, апоморфин, бруцин, колхицин, папаверин и физостигмин. Его также можно применять для обнаружения органических соединений, содержащих йод, токоферолацетатов.

Аминокислоты

Обнаруживаемая группа

Реактив

Состав реактива и проведение обработки

Аминокислоты 2-Нафтохинон-4-сульфокислота (натриевая соль)
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 0,2 г натриевой соли 2-нафтохино-4-сульфокислоты кастворяют в 100 мл 5% раствора карбоната натрия. Опрыскиваме следует проводить приблизительно через 10-15 мин после приготовления раствора для опрыскивания, без последующей обработки.
Аминокислоты (Аргинин и гуанидин) 1-Нафтол
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 1) 0,1% раствор 1-нафтола в 1 н. КОН. 2) Смесь 100 мл 5% водного раствора NaOH и 2 мл брома.Проведение реакции: сначала опрыскивают раствором 1, затем раствором 2. При обнаружении стрептомицина рекомендуют вместо раствора 2 использовать смесь 50 мл водного раствора гипохлорита натрия (13% активного хлора) и 50 мл этанола.
Аминокислоты (оксиаминокислоты: серин, треонин, оксипролин) Реактив Несслера
Посмотреть
Растворы для опрыскивания: 1) 1%-ный водный раствор метапериодата натрия. 2) Реактив Несслера.Проведение реакции: опрыскивают раствором 1, затем хроматограмму высушивают при комнатной температуре и опрыскивают реактивом 2.
Аминокислоты и амины Нингидриин
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 0,3 г нингидрина растворяют в 100 мл н-бутанола и добавляют 3 мл ледяной уксусной кислоты.Последующая обработка: пластинку нагревают около 30 мин при 60 0С или 10 мин при 110 0С.
Чувствительность: от 0,1 нг для пролина до 0,001 нг для глицина.
Стабилизация окрашенного нингидрином пятна.
Раствор для опрыскивания: 1 мл насыщенного водного раствора ни-трата меди с добавкой 0,2 мл 10%-ной азотной кислоты растворяют в 100 мл этилового спирта (96%).
Проведение реакции: на нингидриновое пятно напыляют раствор до максимально интенсивного окрашивания и помещают пластинку в закрытый сосуд, содержащий стакан с концентрированным аммиаком. Образующийся красный комплекс меди устойчив только в отсутствие свободных ионов водорода и сильных комплексообразователей.
Аминокислоты Нингидрин - нитрат меди (полихроматический реактив)
Посмотреть
Исходные растворы: 1) 0,1 г нингидрина растворяют в 50 мл абсо-лютного спирта и добавляют 100 мл ледяной уксусной кислоты и 2 мл 2,4,6-коллидина. 2) 0,5 г нитрата меди [Сu(NOз)2·3Н2O] растворяют в 50 мл абсолютного спирта.
Перед употреблением смешивают растворы 1 и 2 в отношении 50:3. Пластинки опрыскивают. Последующая обработка: хроматограмму нагре-вают 4 мин до 110 0С и появившееся пятно сразу же отмечают, так как уже через 10 мин оно изменяется и бледнеет (чувствительность около 0,5-1 нг аминокислоты).
Аминокислоты (орнитин, лизин) и амины Ванилин
Посмотреть
Растворы для опрыскивания: 1) 2 ванилина растворяют в 100 мл н-пропанола.
2) 1°/о раствор КОН в спирте.
Проведение реакции: хроматограмму опрыскивают раствором 1 и 10 мин нагревают при 110° в сушильном шкафу. Орнитин дает яркую желто-зеленую флуоресценцию в монохроматическом УФ-свете, лизин - слабую желто-зеленую флуоресценцию. После опрыскивания раствором 2 еще раз нагревают. Орнитин сначала окрашивается в розовый цвет, а затем бледнеет, а протин, окснпролин, пипеколиновая кислота и саркозин через несколько часов окрашиваются в красный цвет, гликоколь становится сине-зеленым, остальные аминокислоты окрашиваются в светло-коричневый цвет.

Амины

Обнаруживаемая группа

Реактив

Состав реактива и проведение обработки

Амины Азотная кислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: к 100 мл абсолютного этанола добавляют приблизительно 50 капель азотной кислоты (1,40). (Наблюдение продуктов разложения в монохроматическом ультрафиолетовом свете).П р и м е ч а н и е. Раствор для опрыскивания этой концентрации или большей может найти применение также для открытия других органических соединений при хроматографии в тонких слоях. Флуоресцирующие пятна появляются часто только после длительного нагревания при 120 °C.
Амины (вторичные алифатические и алициклические) Нитропруссид натрия
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 5 г нитропруссида натрия растворяют в 100 мл 10% водного раствора ацетальдегида. Перед употряблением 1 объем этого раствора смешивают с 1 объемом 2% раствора карбоната натрия.
Амины (фенилэтиламины) Йодат калия
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 1%-ный водный раствор йодата калия.Проведение реакции: после опрыскивания хроматограмму нагревают 2 мин при 100-110 0C.
Ариламины и подобные соединения Хромовая смесь
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 5 г бихромата калия растворяют в 100 мл 40% серной кислоты (различная окраска, в зависимости от амина).
Ароматические амины Глюкоза - фосфорная кислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 2 г. глюкозы растворяют в смеси 10 .мл ортофосфорной кислоты (1,70) и 40 мл воды. В раствор добавляют 30 мл этанола н 30 мл н-бутанола.
Последующая обработка: пластинки нагревают около 10 мин, при 115°.
Этаноламин п-Хинон
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 0,5 г п-хинона (бензохинона) растворяют в смеси 10 мл пиридина и 40 мл бутанола. После опрыскивания сразу жe появляется красное пятно этаноламина. Холин с реактивом не реагирует.
Цитруллин, мочевины, триптамин, триптофан 4-Диметиламинобензальдегид - соляная кислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания (водный): реактив Эрлиха на уробилиногене.Раствор для опрыскивания (спиртовой): 1%-ный раствор 4'-диметнламинобензальдегида в 96%-ном этаноле.Проведение реакции: в зависимости от условий опрыскивают водным или спиртовым раствором.
Последующая обработка: обработанную раствором хроматограмму помещают на 3-5 мин в сосуд, насыщенный парами соляной кислоты.

Кислоты

Обнаруживаемая группа

Реактив

Состав реактива и проведение обработки

Кислоты Глюкоза - анилин
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 2 г глюкозы растворяют в 20 лад воды; растворяют также 2 мл анилина в 20 мл этанола. Оба раствора сливают в мерную колбу на 100 .дм и доводят до метки н-бутанолом.
Проведение реакции: после опрыскивания хроматограмму нагревают 5-10 мин при 125 0C (темно-коричневое пятно на белом фоне).
Кислоты 2,6-Дихлорфенолиндофенолнатрий
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 1%-ный раствор 2,6-дихлорфенолиндофенол натрия в этаноле. (Красное пятно на светло-голубом фоне быстро бледнеет).
Кислоты Нитрат серебра - пирагаллол
Посмотреть
Растворы для опрыскивания: 1) 0,17 г нитрата серебра растворяют в 1 мл воды, добавляют 5 мл раствора аммиака и разбавляют до 200 мл этанолом. 2) 6,5 мг (0,0005 моля) пирогаллола растворяют в 100 мл этанола.Проведение реакции: сначала опрыскивают раствором 1, потом раствором 2.
Кислоты Хинидин
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 0,3% раствор хинидина в хлороформе.Предварительная обработка: при обработке хроматограммы растворителем, содержащим летучие кислоты (нелетучие использовать нельзя), необходимо нагревать затем пластинку в токе воздуха до 60-80 0C.Проведение реакции: после интенсивного опрыскивания хроматаграмму нагревают в течение 10 мин при 110-120 0C в сушильном шкафу и рассматривают в монохроматическом ультрафиолетовом свете.
Тиокислоты Нитрат серебра - аммиак - хлорид натрия
Посмотреть
Растворы для опрыскивания: 1.) 50 мл 0,1 н. раствора смешивают перед употреблением с 50 мл 10% раствора аммиака. Эту смесь хранить нельзя. 2) 10% водный раствор хлорида натрия.Проведение реакции: сначала опрыскивают раствором 1, затем сушат и опрыскивают раствором 2
Хроматограмму оставляют на дневном свету на некоторое время до максимального окрашивания пятен.
Фосфорные кислоты Молибдат аммония - хлорид олова (II)
Посмотреть
Растворы для опрыскивания: 1) 1%-ный водный раствор молибдата аммония. 2) 1%-ный раствор хлорида олова (II) в 10%-ной соляной кислоте.Проведение реакции: опрыскивают раствором 1 и после высушивания - раствором 2; в случае необходимости 3-5 мин нагревают при 105 0С.
Барбитуровые кислоты Нитрат кобальта - аммиакат
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 1% раствор нитрата кобальта в абсолютном этаноле.
Последующая обработка: хроматограоту высушивают и помещают в сосуд с газообразным аммиаком, насыщенным водяными парами.
В а р и а н т ы: а) Раствор для опрыскивания: 2% спиртовый раствор ацетата кобальта.
Последующая обработка: помещают хроматограмму в сосуд с парами пиридина.
б) Растворы для опрыскивания: 1) 0,5% раствор ацетата кобальта в метаноле. 2) 0,5% раствор гидроокиси лития в метаноле.
Проведение реакции. Опрыскивают раствором 1, а затем раствором 2.
Барбитуровые кислоты Нитрат ртути (I)
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 1% водный раствор нитрата ртути (I)118. Ацетат ртути - дифенилкарбазон для пуринов.Растворы для опрыскивания: 1) 0,25 г ацетата ртути (1) растворяют с добавлением нескольких капель ледяной уксусной кислоты в 100 мл 96% этанола. 2)0,05 г дифенилкарбазона растворяют в 100 мл, 96% этанола.Проведение реакции: сначала опрыскивают раствором 1, а затем раствором 2. Хроматограмма становится фиолетовой, но на месте, где находится пурин, появляется потемнение. При нагревании до 120 0C в сушильном шкафу с окошком фон постепенно обесцвечивается.Примечание: Отдельные ртутные пятна имеют различную устойчивость и постепенно исчезают при нагревании, вследствие чего в процессе нагревания необходимо непрерывное наблюдение. Лучше всего обвести карандашом пятна сразу же после их появления.
Пиридиимонокарбоновые кислоты Бензидин - сульфат меди
Посмотреть
Растворы для опрыскивания: 1) 0,3 г сульфата меди растворяют в 100 мл смеси, состоящей из 5 объемов воды и 4 объемов этанола. 2) 0,1%-ный раствор бензидина в 50%-ном этаноле.Проведение реакций: после опрыскивания раствором 1 хроматограмму высушивают при 60°, а затем опрыскивают раствором 2 (синие пятна).
Урановые кислот и флавониды Основной ацетат свинца
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: отфильтрованный насыщенный водой раствор ацетата свинца. Последующая обработка: сушат в течение 10 мин при 110 0C.

Липиды

Обнаруживаемая группа

Реактив

Состав реактива и проведение обработки

Липиды Бромтимоловый синий
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 0,04 г бромтимолового синего растворяют в 100 мл 0,01 н. NaOH.
Липиды Фосфорновольфрамовая кислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 20% раствор фосфорновольфрамовой кислоты в этаноле. Последующая обработка: нагревают 20 мин в сушильном шкафу при 70 0C.
Липиды (Насыщенные и ненасыщенные) 2',7'-Дихлорфлуореецеин
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 0,2%-ный раствор 2',7'-дихлорфлуаресцеина в 96%-ном этаноле.
Липиды с прямой цепью Циклодекстрин
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 1% раствор а-цнклодекстрина в 30% этиловом спирте.Последующая обработка: после опрыскивания пластинку помещают в сосуд с парами йода.
Гликолипиды Дифениламин
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: готовят смесь из 20 мл 10%-кого раствора дифениламина в этаноле, 100 мл концентрированной соляной кислоты и 80 мл ледяной уксусной кислоты.Последующая обработка: нагревают 5-10 мин при 100 0C.

Перекиси

Обнаруживаемая группа

Реактив

Состав реактива и проведение обработки

Перикиси Йодид калия - крахмал
Посмотреть
Растворы для опрыскивания: 1) 40 мл 4% водного раствора йодида калия смешивают с 40 мл ледяной уксусной кислоты и добавляют немного (на кончике шпателя) цинковой пыли.
2) 1%-ный свежеприготовленный водный раствор крахмала.
Проведение реакции: после отфильтровывания цинковой пыли опрыскивают раствором 1. Через 5 мин проводят интенсивное опрыскивание реактивом 2, пока слой не станет прозрачным, причем перекись можно обнаружить по выделившемуся йоду в виде голубого пятна.
Перекиси Роданид аммония - сульфат железа (II)
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 0,2 г роданида аммония растворяют в 15 мл ацетона. Непосредственно перед употреблением добавляют 10 мл свежеприготовленного 4% водного раствора сульфата железа (II).Примечание. Только быстрое появление красно-коричневого пятна или зоны указывает на присутствие перекиси. Спустя некоторое время весь слой окрашивается в красновато-коричневый цвет.
Перекиси Тиоцианат аммония
Посмотреть
Растворы для опрыскивания: 1) 0.4 г тиоциаиата растворяют в 30 мл ацетона 2) 1,2 г сульфата железа (II) растворяют в 30 мл воды.Проведение реакции: сначала опрыскивают раствором 1, недолго сушат, а затем опрыскивают раствором 2.

Сахара

Обнаруживаемая группа

Реактив

Состав реактива и проведение обработки

Сахара (кетозы и урановые кислоты) 1,3-Диоксинафталин (нафторезорцин)-трихлоруксусная кислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 1 объем спиртового раствора нафторезорцина (0,2 г нафторезорцина в 100 мл этанола) перед употреблением смешивают с 1 объемом 20%-наго водного раствора трихлоруксусной кислоты.
Последующая обработка: для обнаружения кетоз нагревают 5-10 мин в сушильном шкафу при 100 -105°, для обнаружения урановых кислот нагревают I0-I5 мин во влажной атмосфере (водяная баня) при 70-80 0C. Примечание. Окраске мешает присутствие коллидина и пиридина. Вместо нафторезорцина можно применять резорцин, орцин, флороглюцин или 1-нафтол; 1 объем трихлоруксусной кислоты можно заменить 0,1 частью ортофосфорной кислоты (d=1,7).
Сахара (аминосахара) 4-Диметиламинобензальдегид-ацетилацетон
Посмотреть
Растворы для опрыскивания: 1) 0,5 мл смеси из а мл 50%-наго водного раствора КОН и 20 мл этанола непосредственно перед употреблением добавляют к 10 мл смеси из 0,5 мл ацетилацетона и 50 мл н-бутанола. 2) 1 г 4-диметиламинобензальдегида растворяют в 30 мл этанола. Раствор смешивают с 30 мл соляной кислоты (.1,1,9). Перед употреблением разбавляют 180 мл бутанола-1.
Проведение реакции: после опрыскивания раствором 1 пластинки нагревают 5 мин при 100, а после опрыскивания раствором 2 сушат. 5 мин при 90 0C.
Сахара (дезоксисахара) п-Нитроанилин - периодная кислота
Посмотреть
Растворы для опрыскивания: 1) 1 объем насыщенного водного раствора метапериодата натрия разбавляют 2 объемами воды. 2) 4 объема 1% раствора п-нитроанилина в этаноле смешивают с 1 объемом соляной кислоты (1,19).Проведение реакции: после опрыскивания пластинки раствором 1 ждут 10 мин, затем опрыскивают раствором 2. Дезоксисахара и гликоли дают желтое сильно флуоресцирующее в УФ-свете пятно. При опрыскивании 5% метанольным раствором NaOH окраска переходит в зеленую.
Сахара (дезоксисахара) Нитропруссид натрия - периодат натрия
Посмотреть
Растворы для опрыскивания: 1) Смесь 1 объема насыщенного водного раствора перйодата натрия и 2 объемов воды. 2) Смесь 1 объем насыщенного водного раствора нитропрусида натрия, 3 объемов воды и 20 объемов насыщенного раствора пиперазина в 96% этаноле.Проведение реакции: опрыскивают раствором 1, 10 мин сушат при комнатной температуре и затем опрыскивают раствором 2.Примечание: Максимальная голубая окраска дезоксисахаров наблюдается спустя 10 мин. Чувствительность обнаружения повышается при замене раствора для опрыскивания II смесью 4 объемов 1% раствора п-нитроанилина в этаноле и 1 объема 36% соляной кислоты (желтое флуоресцирующее пятно в монохроматическом УФ-свете).
Сахара, стероиды, терпены Анисовый альдегид - серная кислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: свежеприготовленный раствор 0,5 мл анисового альдегида в 50 мл ледяной уксусной кислоты с добавкой 1 мл серной кислоты (1,84).
Последующая обработка: 5-10 мин нагревают при 100-110 °С. Розовый фон можно осветлить действием водяных паров (водяная баня). (Вещества, содержащиеся в лишайниках, фенолы, терпены, сахара и стероиды окрашиваются, в зависимости от соединения, в фиолетовый, синий, красный, серый или зеленый цвет).
В а р н а н т ы :
а) Раствор для опрыскивания: 1 мл анисового альдегида вносят в 97 мл ледяной уксусной кислоты н к смеси добавляют 2 мл концентрированной серной кислоты.Последующая обработка: нагревают 6 мин при 120 °C.
б) 0,5 мл анисового альдегида растворяют в смеси 10 мл ледяной уксусной кислоты + 85 мл метанола и добавляют 5 мл концентрированной серной кислоты. Для обнаружения производных терпена и др. около 10 мл этой смеси распыляют на пластинке 20Х20 см и нагревают приблизительно 10 мин при 100 °C.
в) Для обнаружения сахаров применяют свежеприготовленную смесь 0,5 мл анисового альдегида + 9 мл этанола (95%-ного) + 0,5 мл концентрированной серной кислоты + 0,1 мл ледяной уксусной кислоты. После опрыскивания пластинку нагревают 5-10 мин при 90-100 °C.
Сахара (кетозы) Антроновый реактив
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 0,3 г антрона растворяют в 10 мл ледяной уксусной кислоты и в раствор добавляют 20 мл 96%-ного этанола, 3 мл фосфорной кислоты (1,7) и 1 мл воды. Этот раствор устойчив в холодильнике в течение нескольких недель.Проведение реакции: после опрыскивания хроматограмму 5-6 мин нагревают до температуры 110 °C. Кетозы и кетозы, содержащие олигосахарнды, появляются в виде желтых пятен.
Сахара (кетозы) Мочевина - соляная кислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 5 г мочевины растворяют в 20 мл 2 ч. соляной кислоты. Раствор смешивают с 100 мл этанола. Кетозы и кетозы содержащие олигосахариды, приобретают синюю окраску. Непродолжительное нагревание способствует реакции.
Сахара и сахарные спирты Нитрат серебра
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 1 мл насыщенного водного раствора нитрата серебра при помешивании добавляют к 20 мл ацетона, а затем медленно по каплям прибавляют воду до полного растворения выпавшего нитрата серебра.Последующая обработка: пластинку помещают приблизительно на 15 мин в камеру, насыщенную аммиаком (в темноте) и сразу после этого нагревают при 80° до появления отчетливых темных пятен.
Сахара, барбитуровые кислоты и т. д. Дифениламин -
4-сульфоновокислый барий
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: готовят насыщенный раствор (0,2%-ный дифениламиносульфоновокислого бария в метаноле.Последующая обработка: если после интенсивного опрыскивания пятно не флуоресцирует в УФ-свете (254 нм), то пластинку нагревают 5-10 мин при 110 0C.
Сахара восстановленные, стероиды, глюкозиды, тиокислоты. 2,3,5-Трифенилтетразолийхлорид
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: перед употреблением 1 объем 4% раствора ТФТХ. в метаноле смешивают с 1 объемом 1н. раствора NaOH в метаноле.Последующая обработка: нагревают 5-10 мин при 110 0C. Каждый раз нагревают до появления отчетливых красных пятен, при этом фон остается практически бесцветным.
Восстановленные сахара Анилин-фосфорная кислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 1 объем 2 н. раствора анилина в насыщенном водой бутаноле-1 смешивают с 2 объемами 2 н. раствора ортофосфорной кислоты в бутаноле-1.Последующая обработка: хроматограмму нагревают 10 мин при 105 °C.
Восстановленные сахара Анилинфталат
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 0,93 г анилина и 1,66 г о-фталевой кислоты растворяют в 100 мл насыщенного водой бутанола-1.Последующая обработка: пропитанную хроматограмму нагревают 10 мин при 105 °C.
Кислоты, сахара и сахарные спирты Бензидин - метапериодат натрия
Посмотреть
Растворы для опрыскивания: 1) 0,1%-ный раствор метапериодата натрия.
2) К раствору 2,8 г бензидина в 80 мл 96°/о этанола добавляют 70 мл воды, 30 мл ацетона и 1,5 мл 1 н. соляной кислоты.Проведение реакции: после опрыскивания раствором 1 влажную хроматограмму опрыскивают раствором 2.

Серосодержащие соединения

Обнаруживаемая группа

Реактив

Состав реактива и проведение обработки

SH-Соединения (цистеин), S-соединения (цистин), производные цианамида (аргинин). Нитропруссид натрия
Посмотреть
Растворы для опрыскивания: 1) 1,5 г нитропруссида натрия (динатрий пентацианонитрозилферрат) растворяют в 5 мл 2 н. соляной кислоты. После добавления 95 мл метанола и 10 мл раствора аммиака фильтруют. 2) 2га цианида натрия растворяют в 5 мл воды. Этот раствор доводят метанолом до 100 мл в мерной колбе. Следует принять меры предосторожности при опрыскивании раствором цианида натрия.Проведение реакции: при опрыскивании раствором 1 SH - соединения появляются в виде красных пятен. Аргинин становится оранжевым, а позже серо-голубым. При опрыскивании раствором 2 появляются соединения с мостиками - S-S в виде красных пятен на желтом фоне.
В а р и а н т для связи S-S:
Растворы для опрыскивания: 1) 5 г цианида натрия и 5 г карбоната натрия растворяют в мерной колбе на 100 мл в 23%-ном этаноле. 2) 2 г нитропруссида натрия растворяют в 100 мл 75% этанола.Проведение реакции: при опрыскивании раствором 1 SH-соединения сушат на воздухе в течение короткого времени, а затем опрыскивают раствором 2.
Персульфаты Бензидин
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 50 мг бензидина растворяют в 100 мл 1 н. уксусной кислоты. После опрыскивания персульфаты окрашиваются в синий цвет.
Сульфонамиды Диазотирование и сочетание с
2-нафтолом
Посмотреть
Растворы для опрыскивания: 1) 1 г нитрита натрия в 100 мл 1 н. соляной кислоты.
2) 0,2%-ный раствор 2-нафтола в 1 н. КОН.
Проведение реакции: опрыскивают свежеприготовленным раствором 1, спустя 1 мин опрыскивают раствором 2 и высушивают хроматограмму при 60 0C.
Тиомочевины Нитропруссид натрия - гидроксиламин
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 0,5 г нитропруссида натрия растворяют в 10 мл воды. К раствору добавляют 0,5 г хлорида гидроксиламмония и 1г бикарбоната натрия. После прекращения выделения газа добавляют 2 капли брома и водой доводят до 25 мл. Реактив сохраняется около двух недель.
Тиосульфаты Гексацианоферрат (III) калия - хлорид железа (III)
Посмотреть
Растворы для опрыскивания: 1) 1% водный раствор гексацианоферрата (III) калия. 2) 1% водный раствор хлорида железа (III).Проведение реакции: опрыскивают сначала раствором 1, затем раствором 2 и рассматривают хроматограмму под аналитической кварцевой лампой.

Спирты, Альдегиды и Кетоны

Обнаруживаемая группа

Реактив

Состав реактива и проведение обработки

а-Кетокислоты о-Фенилендиамин-трихлоруксусная кислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 50 мг о-фенилендиамина растворяют в 100 мл 10% водном растворе трихлоруксусной кислоты.Проведение реакции: после опрыскивания хроматограмму нагревают не более 2 мин в сушильном шкафу при 100 0C, после чего флуоркцирующие пятна рассматривают под аналитической кварцевой лампой.
Альдегидные и кетонные группы, а также кетозы 2,4-Динитрофенилгидразин
Посмотреть
Растворы для опрыскивания: ,1) 0,4%-ный раствор 2,4-Динитрофенилгидразина в 2 н. соляной кислоте.
2) 1 г 2,4-динитрофенилгидразина в 1000 мл этанола смешивают с 10 мл соляной кислоты (1,19) (желтое пятно).
П р и м е ч а н н е. Можно применять раствор 1 или 2.
Восстановленные вещества

Нитрат серебра - аммиак
(реакция Толленса)

Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 1 объем 0,1 н. раствора нитрата серебра смешивают по мере необходимости с 1 объемом 5 н. раствора аммиака. Обращаться осторожно! При длительном стоянии образуется взрывчатый азид серебра.Последующая обработка: 5-10 мин нагревают при 105 0 C до появления отчетливых темных пятен.
Восстановители Фосфорномолибденовая кислота
Посмотреть
Растворы для опрыскивания: а) свежеприготовленный раствор 5 г фосфорномолибденовой кислоты в 100 мл этанола.Последующая обработка: 5 мин нагревают при 80-90 0C, б) свежеприготовленный раствор 10 г фосфорномолибденовой кислоты в 100 мл этапола.Последующая обработка: 5 мин нагревают при 80-90 0C в) Раствор для опрыскивания: свежеприготовленный раствор 10 г фосфорномолибденовой кислоты в 100 мл этанола. Последующая обработка: нагревают 5 мин при 120 0C.Примечание. Обработка парами аммиака обесцвечивает фон.
Высшие спирты и кетоны Ванилин - серная кислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 3 г ванилина растворяют в 100 мл абсолютного спирта и в раствор добавляют 0,5 мл серной кислоты (1,84).
Последующая обработка: хроматограмму нагревают при 120° до появления зелено-голубых пятен.
П р и м е ч а н и е. Вместо серной кислоты можно применять 1,5 г п-толуолсульфокислоты.

Стероиды, терпены и т.п.

Обнаруживаемая группа

Реактив

Состав реактива и проведение обработки

D4-3-Кетостероиды Гидроокись натрия
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 10%-ный водный раствор NaOH.
Проведение реакции: после опрыскивания хроматограмму высушивают в течение 10 мин при 80 0С. D4-3-кетостероиды дают желтую флуоресценцию в монохроматическом ультрафиолете.
Стероиды Бензоилхлорид - хлорид цинка
Посмотреть
Растворы для опрыскивания: 1) Раствор 20 г хлорида цинка в 30 мл ледяной уксусной кислоты.
2) 50 г бензоилхлорида растворяют в хлороформе. Раствор доводят до 100 мл хлороформом.Проведение реакции: пластинки опрыскивают раствором 1, нагревают 5 мин при 90°, сухую хроматограмму опрыскивают раствором 2 и нагревают 2-3 мин при 90° (пятна рассматривают в видимом и ультрафиолетовом свете).
Стероиды Ванилин - фосфорная кислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 1 г ванилина растворяют в 100 мл 50%-ной о-фосфорной кислоты.
Последующая обработка: 10-20 мин нагревают при 1200C.
Стероиды (стероидные глюкозиды) Хлорид сурьмы (III)
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 25 г хлорида сурьмы (III) растворяют в 75 г хлороформа, очищенного от этанола. Для очистки от этанола хлороформ пропускают через колонку с активной окисью алюминия. Как правило, применяют насыщенный раствор хлорида сурьмы (III) в хлороформе или в четыреххлористом углеродe.Последующая обработка: после опрыскивания хроматограмму нагревают 10 мин при 100 0C (рассматривают хроматограмму в монохроматическом ультрафиолетовом свете).
Стероиды Хлорид сурьмы (III) - ледяная уксусная кислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 1 вес. ч. хлорида сурьмы (III) растворяют в 1 вес. ч. ледяной уксусной кислоты.Последующая обработка: пластинки нагревают 5 мин при 95 0C.
Терпены, масла и смолы Хлорид сурьмы (V)
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 2 объема хлорида сурьмы (V) смешивают с. 8 объемами четыреххлористого углерода.Проведение реакции: после опрыскивания пластинки нагревают при 120 0C до появления пятен.
Стероиды и флавоноиды п-Толуолсульфокислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 20 г толуолсульфокислоты растворяют в 100 мл абсолютного этанола.Проведение реакции: после опрыскивания несколько минут нагревают при 100 0C, хроматограмму рассматривают в монохроматическом УФ-свете.
Стероиды и их глюкозиды Трихлоруксусная кислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 25 г трихлоруксусной кислоты растворяют в 100 мл хлороформа.Проведение реакции: после опрыскивания хроматограмму сушат в сушильном шкафу при 100 0C и рассматривают под кварцевой лампой.
Стероиды и их глюкозиды Трифторуксусная кислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 1% раствор трифторуксусной кислоты в хлороформе. Последующая обработка: 5 мин нагревают при 130 0C.
Стероиды Фосфорная кислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 1 объем о-фосфорной кислоты (1,7) разбавляют 1 объемом воды.Проведение реакции: опрыскивают пластинку, пока она во влажном состоянии не станет прозрачной, затем нагревают 10-20 мин при 120° и флуоресцирующие пятна рассматривают под кварцевой лампой.
Стероиды Хлорная кислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 2% водный раствор хлорной кислоты.Последующая обработка: нагревают 10 мин при 150 0C.Примечание. Получают однородное коричневое пятно, годное для количественного определения.
Стероиды (тритерпены, стерины и стероиды) Хлорид олова (IV)
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: к 160 мл смеси равных объемов хлороформа и ледяной уксусной кислоты добавляют 100 мл хлорида олова (IV). Последующая обработка: нагревают 5-18 мин при 100° и рассматривают хроматограмму в фильтрованном УФ-свете (365 нм).Последующая обработка: нагревают 5 -18 мин при 100 0С и рассматривают хроматограмму в фильтрованном УФ-свете (265 нм).
Тритерпены, стерины и стероиды Хлорсульфоновая кислота - ледяная уксусная кислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 5 мл хлорсульфоновой кислоты при осторожном охлаждении растворяют в 10 мл ледяной уксусной кислоты.Последующая обработка: 5 мин нагревают при 130 0. Пластинку рассматривают в ультрафиолетовых лучах (365 нм).
Терпенальдегиды, флавоноиды, углеводы Бензидин
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 0,5 г бензидина растворяют в 20 мл ледяной уксусной кислоты и 80 мл этанола.
Последующая обработка: нагревают 15 мин при 100° (ванилин приобретает окраску от желтой до оранжевой). Пятна некоторых веществ окрашиваются еще сильнее, если после нагревания провести опрыскива-ние разбавленной соляной кислотой.

Фенолы

Обнаруживаемая группа

Реактив

Состав реактива и проведение обработки

Фенолы и амины, применяемые для реакции сочетания Прочная голубая соль В
(диазореактив)
Посмотреть
Раствор, для опрыскивания: свежеприготовленный 0,5%-ный водный раствор прочной голубой соли В.Последующая обработка: опрыскивают 0,1 н. NaOH.
Фенолы и амины, применяемые для реакции сочетания

Диазотированная сульфаниловая кислота
(диазореактив)

Посмотреть
Приготовление соли диазония: 25 г сульфаниловой кислоты растворяют в 125 мл 10%-наго раствора КОН. (.охлажденный раствор смешивают с 100 мл 10% раствора нитрита натрия. Этот раствор постепенно, по каплям при помешивании прибавляют к охлажденной соляной кислоте (40 мл НС1 (d=1,19) в 20 мл воды). Температура реакционной смеси не должна быть выше 8 0C. Образовавшуюся диазониевую соль отсасывают на пористом фильтре, промывают последовательно ледяной водой, этанолом, эфиром и высушивают. Полученная таким образом соль, сохраняемая в холодильнике в банках из темного стекла, устойчива несколько месяцев. Вследствие ограниченной устойчивости во многих случаях предпочитают прочную голубую соль В (реактив N 28).Раствор для опрыскивания: 0,1 г диазониевой соли перед употреблением растворяют в 20 мл 10% водного раствора соды. Примечание. При приготовлении реактива должны быть учтены правила техники безопасности, соблюдаемые при получении и хранении взрывоопасных диазониевых солей.
Фенолы Диазотированный
п-нитроанилин
Посмотреть
Исходный раствор: 0,7 г п-нитроанилина растворяют в 9 мл концентрированной соляной кислоты (1,19) и разбавляют до 100 мл водой.Раствор для опрыскивания: 4 мл исходного раствора по каплям при охлаждении льдом смешивают с 5 мл 1% водного раствора нитрита натрия, а затем доводят до 100 мл водой, охлажденной льдом.
Примечание. Каждый раз перед употреблением готовят свежий раствор.
Фенолы Фосфорномолибденовая кислота
Посмотреть
10 г вольфрамата натрия и 2,5 г молибдата натрия растворяют в 70 мл воды и добавляют последовательно 5 мл 85% фосфорной кислоты и 10 мл концентрированной соляном кислоты (1,19). Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 10 часов. Затем добавляют 15 г сульфата лития 5 мл воды и 1 каплю брома и еще раз кипятят 15 мин, после охлаждения доводят до 100 мл в мерной колбе (исходный раствор). Раствор не должен иметь зеленой окраски.Реактивы для опрыскивания: 1) 20% водный раствор карбоната натрия. 2) Перед употреблением смешивают 1 часть исходного раствора с 3 объемами воды.Проведение реакции: опрыскивают раствором 1, немного сушат и опрыскивают раствором 2.

Прочие

Обнаруживаемая группа

Реактив

Состав реактива и проведение обработки

Антиокислители, цианамид и его производные 2,6-Дихлорхинонхлоримид
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 1 г 2,6-дихлорхинонхлоринида растворяют в 100 мл абсолютного этанола. Раствор в холодильнике устойчив в течение трех недель. Для мочевины не применим.
Ацетилхолииа и его эфиры Гидроксамовая кислота - хлорид железа
Посмотреть
Исходные растворы: а) 20 г хлорида гидроксиламмония растворяют в 50 мл воды. Раствор доводят дв 200 мл этанолом и хранят в холодиль-нике,
б) 50 г гидроокиси калия растворяют в возможно меньшем количестве воды, затем этанолом доводят до 500 мл.
Растворы для опрыскивания: 1) 1 объем раствора "а" смешивают с 2 объемами раствора "б". Выпавший хлорид калия отфильтровывают. Приготовленный таким образом раствор хранят в холодильнике (устойчив около 2 недель).
2) .16 г тонкоизмельченного порошка хлорида железа (FeCl3*6H2O) растворяют в 20 мл 10 н. соляной кислоты. Раствор встряхивают с 200 мл диэтилового эфира до образования однородного раствора. Хорошо закрытый раствор для опрыскивания 2 устойчив в течение длительного времени.
Проведение реакции: хроматограмму опрыскивают раствором 1, высушивают непродолжительное время при комнатной температуре, а затем опрыскивают раствором 2.
Катехины Ванилин - соляная кислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 0,5 г ванилина растворяют в 50 мл соляной кислоты (1,18). На высушенной при комнатной температуре хроматограмме катехин окрашен в красный цвет.
Креатинин, гликоциамидин и лактамов а-гуанидиновых кислот Пикриновая кислота - щелочь
Посмотреть
Растворы для опрыскивания: 1% раствор пикриновой кислоты в этаноле. 2) 5% спиртовой раствор КОН.Проведение реакции: опрыскивают раствором 1 и после высушивания - раствором 2 (окрашивание в оранжевый цвет).
Кумарины Гидроокись калия
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 1%-ный раствор КОН в этаноле. Проведение реакции: высушенную после опрыскивания хроматограмму рассматривают под аналитической кварцевой лампой.
Лактоны (NIP-ненасыщенные) Нитропруссид натрия - NaOH
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 1 % раствор нитропруссида натрия в 1 н. растворе NaOH, который готовят с 50%-ным этанолом (пятна от красных до красно-фиолетовых).
Лактоны (дигиталоидные пятичленные) 3,5-Динитробензойная кислота
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 1 г 3,5-динитробензонной кислоты растворяют в смеси 50 мл метанола н 50 мл водного 2 н. раствора КОН.
Оксиантрахиноны Ацетат магния
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 0,5%-ный раствор ацетата магния в метаноле.
Проведение реакции: после опрыскивания нагревают в течение 5 мин до 90 0C. Окрашивание от оранжевого до фиолетового.
Пиперонал и ванилин Гидразин-сульфат
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 90 мл насыщенного водного раствора гидразин-сульфата смешивают с 10 мл 4 н, соляной кислоты. Влажную хроматограмму рассматривают под кварцевой лампой до и после действия паров аммиака.
Хлорированные углеводороды, камфары, гетероциклические соединения и т. д. Флуоресцеин натрия - родамин В - карбонат натрия
Посмотреть
Растворы для опрыскивания: 1) 0,5% раствор родамина В в этаноле. 2) 10% водный раствор карбоната натрия.Проведение реакции: пластинки с флуоресцеином натрия (см. реактив 140) опрыскивают после разделения реактивом 1, сушат и интенсивно опрыскивают реактивом 2. Некоторые пятна лучше обнаруживаются в виде флуоресцирующих пятен в свете аналитической кварцевой лампы.
Холим Дипикриламин
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: 0,2 .г дипикриламина растворяют в смеси 50 мл ацетона и 50 мл бидистиллята (холим и производные появляются в виде красных пятен на желтом фоне).
Холим Фосфорномолибденовая кислота - хлорид олова (II)
Посмотреть
Растворы для опрыскивания: 1) 1 г фосфорномолибденовой кислоты растворяют в 100 мл смеси равных объемов этанола и хлороформа. 2) 1 а хлорида цинка (II) растворяют в 100 мл 3 ч. соляной кислоты. Каждый раз приготовляют свежий реактив.
Проведение реакции: пластинки опрыскивают раствором 1, сушат 3 мин, опрыскивают раствором 2 и вновь сушат 10 мин.
Холин Гексацианоферрат (II) калия - хлорид кобальта (II)
Посмотреть
Растворы для опрыскивания: 1) Свежеприготовленный 1% водный раствор гексанцианоферрата (II) калия.
2) 0,5'%)-ный водный раствор хлорида кобальта (II).Проведение реакции: опрыскивают раствором 1, непродолжительное время сушат и опрыскивают раствором 2. Холин становится зеленым.
Цианамид и его производные Нитропруссид натрия - гемсанцианоферрат (III) калия
Посмотреть
Раствор для опрыскивания: по 1 объему 10% раствора NaOH, 10% раствора нитропруссида натрия и 10% раствора гексанцианоферрата (III) калия смешивают с 3 объемами воды. Раствор оставляют стоять при комнатной температуре самое малое на 20 мин. В холодильнике этот раствор сохраняется в течение нескольких недель.В а р и а н т:Раствор для опрыскивания: 2 мл 5% водного раствора нитропруссида натрия смешивают с 1 мл 10% раствора NaOH и 5 мл 3% раствора пергидроля, затем эту смесь разбавляют. 15 мл воды. Каждый раз надо готовить свежий реактив.
Цианамид - фиолетовый,
дицианамид - карминно-красный,
гуанил-мочевина - желто-оранжевая,
гуанидин - красно-оранжевый,
аргинин-светло-красный,
креатин - кармннно-красиый,
креатин - желто-коричневый,
агматин-розовый,
гуанидин-уксусная кислота - карминно-красная,
тиомочевина - фиолетовая,
мочевина - светло-розовая.
Эфиры 3,5-динитробензойной кислоты 1-Нафтиламин
Посмотреть
Растворы для опрыскивания: 1) 1%-ный раствор 1-нафтиламнна в этаноле. 2) 10% раствор едкого кали в метаноле. Красно-коричневое окрашивание.